猪寄生虫病诊断方法!

   猪寄生虫病诊断方法 (一)粪便虫卵检查法 1.直接涂片检查法 是简便和常用的方法,但检查时所用的粪便数量少,故检出率较低。本法是......

  猪寄生虫病诊断方法

  (一)粪便虫卵检查法

  1.直接涂片检查法 是简便和常用的方法,但检查时所用的粪便数量少,故检出率较低。本法是先在载玻片上滴一滴甘油与水的混合液,再用牙签或火柴棍挑起少量粪便加入其中,混匀,夹去较大的粪渣,最后使玻片上留有一层均匀的粪液,其浓度的要求是将此玻片放于书上,能通过粪便液膜模糊地看出其下的字为合适。在粪便上覆以盖玻片,置显微镜下检查。检查时应顺序地查遍盖玻片下所有部分。

  2.水洗沉淀法 取粪便5克,加清水100毫升以上,搅匀成粪液,通过40~60目铜筛过滤,滤液收集于烧杯中,静置沉淀20分钟,倾去上清液,保留沉渣,再加清水混匀,再沉淀,如此反复操作直到上层液体透明后,吸取沉渣检查。

  3.漂浮法 先往青霉素空瓶中加入适量饱和盐水,再往瓶内加入粪便1克,混匀,筛滤,滤液注入另一瓶中,补加饱和盐水溶液使瓶口充满,上覆以盖玻片,并使液面与盖玻片接触,其间不留气泡,直立20分钟后,取下盖玻片检查。此法适用于检查比重比饱盐水溶液轻的虫卵,如一般线虫卵和球虫卵囊等。

  (二)常见虫卵的一般特征

  1.猪蛔虫卵 虫卵短椭圆,棕黄色,大小为56~87微米×46~57微米,壳厚,外表有凹凸不平的蛋白质膜,刚排出的虫卵含一未分裂的卵黄细胞,未受精卵呈现长椭圆形,壳较薄。

  2.结节线虫卵 椭圆形,淡灰色,卵壳薄而光滑,内含8~16个球形的胚细胞。大小为45~55微米×26~36微米。

  3.猪鞭虫卵 呈淡褐色,具有厚而光滑的外膜,两极呈栓塞状,形如腰臌,内有一胚细胞。虫卵大小为52~61微米×27~30微米。

  4.兰氏类圆线虫卵 呈椭圆形,淡灰色,卵壳薄而光滑,卵内含有成形的幼虫,幼虫呈U字形。大小为45~55微米×26~30微米。

  5.布氏姜片虫卵 呈淡黄色,卵壳薄,其一端有不明显的卵盖,卵黄均匀地散布于卵壳内。大小为130~140微米×80~85微米。

  6.球虫卵囊 呈卵园或椭圆形,淡灰色,壳薄而光滑,内有颗粒状的原生质团块。其大小因种类不同而不同,大的为24.6~31.9微米×23.2~24.0微米,小的为11.2~16.0微米×9.6~12.8微米。

  (三)猪疥螨的实验室检查方法

  1.病料的采取

  疥螨寄生于猪的皮内,因此应刮取皮屑,置于显微镜下,寻找虫体。刮取皮屑的方法很重要,应选择患病皮肤与健康皮肤交界处,这里的螨较多,往往在耳壳内容易寻找。先在要刮取的皮肤处滴加少许50%的甘油水溶液,然后用将边缘磨锐的不锈钢小勺耒刮取皮屑,直到皮肤轻微出血。将刮下的皮屑置入试管或塑料袋内,带回供检查。

  2.检查方法

  (1)显微镜下直接检查法 将刮下的皮屑置载玻片上,加入少量50%甘油水溶液,覆以另一张载玻片。搓压载玻片使病料散开,分开载玻片,置显微镜下检查。此法适合于检查皮屑中虫体较多的病料。

  (2)虫体浓集法 为了在较多的病料中,检出其中较少的虫体,提高检出率,可采用浓集法。此法先取较多的病料,置于试管中,加入10%NaOH溶液,在洒精灯上煮沸数分钟,使皮屑溶解,虫体自皮屑中分离出来。然后其自然沉淀或以每分钟2 000转/分钟的速度离心20分钟,吸取沉渣镜检。

  (四)猪附红细胞体的实验室检查方法

  可用来作为诊断的最重要的临床症状是:贫血,对外界反应迟钝,发热高达40℃或更高。其它示病症状是:耳廓边缘变色,皮肤变态反应。

  查找病原是确认该病的主要方法,新鲜血液加等量生理盐水稀释后置显微镜下观察,可见虫体呈球形,逗点形,杆状或颗粒状。由于虫体附着在红细胞表面有张力作用,红细胞在视野内上下震动或左右运动,红细胞形态也发生了变化,呈菠萝状、锯齿状、星状等不规则形状。血液姬姆萨染色后,虫体可染成紫红色,但该种染色方法的缺点是姬姆萨色素沉着,容易形成假像。血清经吖啶橙染色在荧光显微镜下可见各种形状的附红细胞体单体。但这一技术的复杂性使其只适宜实验室诊断。该染色情况下,附红细胞体呈浅至深桔黄色。

  血清诊断方法包括IHA试验、补体结合试验或ELISA方法,但抗体的产生与病原数量的增多(而不是与感染发生的时间)有暂时的相关性。这意味着抗体的产生呈波浪形。即使数次急性发作后,抗体滴度也只能在2-3个月内维持较高水平,之后便会下降到阈值以下,这表明假阴性是常见的。所有血清学方法只适合于群体诊断。

  PCR诊断已经成功地用于猪附红细胞体病。不过,该方法不能区别带虫猪和发病猪。

  动物试验也是确认猪附红细胞体病的方法之一。常用的试验动物是小白鼠,用小猪作试验动物时则需摘除脾脏。怀疑为猪附红细胞体病的猪在切除脾脏后观察3-20天,若是带虫猪则会出现急性附红细胞体的症状,此时可通过查找血涂片中的虫体进行

  猪寄生虫病诊断

  猪附红细胞体病的诊断方法

  猪附红细胞体病的诊断方法主要有以下几种:

  1、悬滴法

  新鲜血液加等量生理盐水稀释后吸取数滴置载玻片上,加盖盖玻片,置显微镜下观察,可见虫体呈球形,逗点形,杆状或颗粒状。由于虫体附着在红细胞表面有张力作用,红细胞在视野内上下震动或左右运动,红细胞形态也发生了变化,呈菠萝状、锯齿状、星状等不规则形状。

  该方法也适用于抗凝血液。抗凝血液存放1-2天一般并不影响检测结果。

  2、直接涂片法

  取新鲜或抗凝血少许置载玻片上推成薄层,然后在显微镜下直接观察。可看到附红细胞体呈球形,逗点形,杆状或颗粒状。寄生有附红细胞体的红细胞呈菠萝状、锯齿状、星状等不规则形状。该方法的优点是简单、快速。不足之处一是对推片的技术有一定要求,红细胞必需推成薄层;二是容易和其他导致红细胞变形的情况混淆。

  3、染色检查

  血液涂片经姬姆萨染色后,虫体可染成紫红色,但该种染色方法的缺点是姬姆萨色素沉着,容易形成假像。血清经吖啶橙染色在荧光显微镜下可见各种形状的附红细胞体单体。但这一技术的复杂性使其只适宜实验室诊断。该染色情况下,附红细胞体呈浅至深桔黄色。

  4、血清学诊断

  包括IHA试验、补体结合试验或ELISA方法,但抗体的产生与病原数量的增多(而不是与感染发生的时间)有暂时的相关性。这意味着抗体的产生呈波浪形。即使数次急性发作后,抗体滴度也只能在2-3个月内维持较高水平,之后便会下降到阈值以下,这表明假阴性是常见的。所有血清学方法只适合于群体诊断。

  5、PCR诊断

  国外已有PCR技术用于猪附红细胞体病诊断的报道。不过,该方法不能区分带虫猪和发病猪。

  6、动物试验

  常用的试验动物是小白鼠,用小猪作试验动物时则需摘除脾脏。怀疑为猪附红细胞体病的猪在切除脾脏后观察3-20天,若是带虫猪则会出现急性附红细胞体的症状,此时可通过查找血涂片中的虫体进行诊断。

[责任编辑:猪小妹 ]
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